Coloration de Gram: comment elle est fabriquée et à quoi elle sert

Contenu

• Comment se fait la coloration de Gram
• Pourquoi est-ce

La coloration de Gram, ou simplement Gram, est une technique simple et rapide qui vise à différencier les bactéries en fonction des caractéristiques de leur paroi cellulaire après exposition à différents colorants et solutions.

Ainsi, grâce à la coloration de Gram, il est possible de vérifier, en plus de la forme des bactéries, la couleur qu'elles acquièrent, et ce résultat est important pour définir d'autres stratégies d'identification des espèces bactériennes et pour le médecin d'indiquer un traitement préventif. selon les caractéristiques observées au microscope.

La coloration de Gram est généralement effectuée en routine en laboratoire et fait partie de l'examen bactérioscopique. Comprenez ce qu'est la bactérioscopie et comment elle est effectuée.

Comment se fait la coloration de Gram

La coloration de Gram est une méthode rapide, pratique et peu coûteuse pour identifier les bactéries responsables des infections, étant utile pour les médecins pour indiquer un traitement préventif de l'infection qui peut survenir, car les caractéristiques spécifiques de ces groupes de bactéries sont connues,

La coloration de Gram se fait en 7 étapes principales, cependant le protocole peut varier en fonction du laboratoire:

1. Placer quelques colonies de la bactérie sur la lame en ajoutant une goutte d'eau pour faciliter l'homogénéisation des colonies;
2. Laissez sécher un peu, et la lame peut passer rapidement à travers la flamme pour favoriser le séchage, cependant il est important de faire attention à la température, car si la température est trop élevée, il est possible qu'il y ait un changement dans la structure du bactéries, qui peuvent interférer avec le résultat de l'examen;
3. Lorsque la lame est sèche, couvrez avec le colorant cristal violet et laissez agir pendant environ 1 minute;
4. Lavez la lame avec un jet d'eau courante et couvrez la lame avec le lugol, qui a pour objectif de fixer le colorant bleu, et laissez agir 1 minute. Les deux types de bactéries peuvent absorber le complexe formé par le colorant et le lugol, devenant bleu;
5. Ensuite, lavez la lame à l'eau courante et appliquez de l'alcool à 95% en la laissant agir pendant 30 secondes. L'alcool est responsable de la dissolution de la membrane lipidique qui forme les bactéries à Gram négatif et, ainsi, de l'élimination du complexe formé entre le colorant et le lugol, décolorant ces bactéries. Cependant, dans le cas des bactéries à Gram positif, l'alcool déshydrate la paroi cellulaire des bactéries à Gram positif, provoquant la contraction des pores et les rendant imperméables;
6. Ensuite, lavez à nouveau à l'eau courante et couvrez la lame avec le deuxième colorant, la fuchsine ou la safranine et laissez agir pendant 30 secondes;
7. Ensuite, lavez la lame sous l'eau courante et laissez-la sécher à température ambiante.

Dès que la lame est sèche, il est possible de mettre une goutte d'huile d'immersion et d'observer la lame au microscope avec un objectif 100x, étant possible de vérifier la présence ou l'absence de bactéries, ainsi que la présence de levures et épithéliales cellules.

Pourquoi est-ce

La coloration de Gram a pour objectif principal de différencier les bactéries en fonction des caractéristiques de la paroi cellulaire et de la morphologie générale. Ainsi, selon les caractéristiques observées au microscope, les bactéries peuvent être classées en:

• Bactéries Gram-positives, qui sont visualisés avec une couleur bleue en raison du fait qu'ils ne sont pas décolorés par l'alcool, car ils ont une paroi cellulaire plus épaisse et leurs pores se contractent lorsqu'ils sont exposés au lugol;
• Bactéries Gram-négatives, qui sont visualisés avec une couleur rose / violette en raison du fait qu'ils sont décolorés par l'alcool et colorés par la safranine ou la fuchsine.

Après avoir observé les bactéries au microscope, il est possible que d'autres tests soient effectués en laboratoire pour identifier les espèces de bactéries. Cependant, grâce au Gram et à l'association avec les signes et symptômes présentés par la personne, le médecin peut indiquer un traitement préventif jusqu'à ce que le résultat d'examens plus spécifiques soit disponible, car il est ainsi possible de réduire le taux de réplication bactérienne et d'éviter les complications.